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技術(shù)文章/ ARTICLE

我的位置:首頁  >  技術(shù)文章  >  單個核細(xì)胞分離液系列

單個核細(xì)胞分離液系列

更新時間:2016-07-14      瀏覽次數(shù):1293

 

1. 適用于各種動物血液及組織本系列產(chǎn)品檢索:

 

 

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人臟器組織單個核細(xì)胞分離液(FICOLL 配置)

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人腫瘤浸潤組織單個核細(xì)胞分離液

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大鼠全血單個核細(xì)胞分離液

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大鼠臟器組織單個核細(xì)胞分離液

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大鼠腫瘤浸潤組織單個核細(xì)胞分離液

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小鼠外周血單個核細(xì)胞分離液

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小鼠臟器組織單個核細(xì)胞分離液

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小鼠腫瘤浸潤組織單個核細(xì)胞分離液

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豚鼠外周血單個核細(xì)胞分離液

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豚鼠腫瘤浸潤組織單個核細(xì)胞分離液

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雞外周血單個核細(xì)胞分離液

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鴨外周血單個核細(xì)胞分離液

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豬腸粘膜組織單個核細(xì)胞分離液

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羊外周血單個核細(xì)胞分離液

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兔外周血單個核細(xì)胞分離液

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兔腫瘤浸潤組織單個核細(xì)胞分離液

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魚全血單個核細(xì)胞分離液

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魚臟器組織單個核細(xì)胞分離液

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2. 使用方法說明及圖例

 

 

2.1血液樣本分離液使用說明及圖例

 

A. 量分離-使用 1-2ml 鮮抗凝血(分離圖例見圖例 1

 

a.新鮮抗凝血1-2ml,與全血及組織稀釋液(Cat#:2010C1119)1:1混勻;

 

b.心加于與混合液等體積的細(xì)胞分離液之液面上;

 

c.400g(約1500轉(zhuǎn)/分)離心15鐘(半徑15cm平轉(zhuǎn)子);

 

此時離心管中由上至下細(xì)胞分為四層。*層;為血漿層。第二層;為環(huán)狀乳白色單

個核細(xì)胞層。三層;為透明分離液層。第四層;為紅細(xì)胞層。收集第二層細(xì)胞放入含4-5ml 細(xì)胞洗滌液(Cat#:2010X1118)的試管中,充分混勻后,以500g(約1800轉(zhuǎn)/分)離心20 分鐘,棄去上清留沉淀細(xì)胞重新懸起。重復(fù)洗滌2次即得所需單個核細(xì)胞。

 

 

B. 量分離-使用 5-10ml 新鮮抗凝血(分離圖例見圖例 1

a.新鮮抗凝血5-10ml,與全血及組織稀釋液(Cat#:2010C1119)1:1勻;

 

b.混合液小心疊加于細(xì)胞分離液之液面上(混合液:分離液=2:1);

 

c.  500g(約 1800 轉(zhuǎn)/分)離心 15 鐘(半徑 15cm 平轉(zhuǎn)子);

 

此時離心管中由上至下細(xì)胞分為四層。*層;為血漿層。第二層;為環(huán)狀乳白色單

個核細(xì)胞層。三層;為透明分離液層。第四層;為紅細(xì)胞層。收集第二層細(xì)胞放入含10ml 細(xì)胞洗滌液(Cat#:2010X1118)的試管中,充分混勻后,以500g(約1800轉(zhuǎn)/分)離心20 分鐘,棄去上清留沉淀細(xì)胞重新懸起。重復(fù)洗滌2次即得所需單個核細(xì)胞。

 

 

C. 量分離 I-使用 20ml 鮮抗凝血(分離圖例見圖例 2

a.新鮮抗凝血20ml200g1100轉(zhuǎn)/分)離心20鐘棄去血漿;

b.棄去血漿的血細(xì)胞加入全血及組織稀釋液(Cat#:2010C1119)12ml心混勻;

 

c.混合液小心疊加于細(xì)胞分離液之液面上(混合液:分離液=2:1);

 

d.  600g(約 2000 轉(zhuǎn)/分)離心 15 鐘(半徑 15cm 平轉(zhuǎn)子);

 

此時離心管中由上至下細(xì)胞分為四層。*層;為血漿層。第二層;為環(huán)狀乳白色單個

核細(xì)胞層。三層;為透明分離液層。第四層;為紅細(xì)胞層。收集第二層細(xì)胞放入含 20ml 細(xì)胞洗滌液(Cat#:2010X1118)的試管中,充分混勻后,以500g(約1800轉(zhuǎn)/分)離心20 分鐘,棄去上清留沉淀細(xì)胞重新懸起。重復(fù)洗滌2次即得所需單個核細(xì)胞。

 

 

D. 量分離 II-使 50ml 新鮮抗凝血(分離圖例見圖例 3

a.取新鮮抗凝血50mlHES-TBD5501:1混合后再與1份注射用生理鹽水混勻20-30

20-30鐘。吸取混濁的上清液備用,棄去底部紅細(xì)胞。

b.將步驟1中留取的上清液以200g(約1100轉(zhuǎn)/分)離心20鐘棄去上清保留沉淀細(xì)

;

c.沉淀的細(xì)胞加入全血及組織稀釋液(Cat#:2010C1119)20ml心混勻;

 

d.混合液小心疊加于細(xì)胞分離液之液面上(混合液:分離液=2:1);

 

e.  600g(約 2000 轉(zhuǎn)/分)離心 15 鐘(半徑 15cm 平轉(zhuǎn)子);

 

此時離心管中由上至下細(xì)胞分為四層。*層;為血漿層。第二層;為環(huán)狀乳白色單個

核細(xì)胞層。第三層;為透明分離液層。第四層;為紅細(xì)胞層。收集第二層細(xì)胞放入含 20ml

細(xì)胞洗滌液(Cat#:2010X1118)的試管中,充分混勻后,以500g(約1800轉(zhuǎn)/分)離心20

 

分鐘,棄去上清留沉淀細(xì)胞重新懸起。重復(fù)洗滌2次即得所需單個核細(xì)胞。

注:提取率約為80%。

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